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    丙基硫氧嘧啶对实验性自身免疫性甲状腺炎的干预治疗
     
    文档类型 doc 更新日期 2013-07-26 16:13
    文件大小 1.56M 浏览次数 2561
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    详细介绍
     

    桥本甲状腺炎(Hashimoto thyroiditis,HT)是一种器官特异性自身免疫性疾病,随着饮食中含碘量的增加、生活节奏的改变,加上内环境的影响,本病的发病率呈现逐年增高的趋势。目前临床上针对HT尚没有特殊的治疗方法,大多局限于甲状腺激素水平的调节。对于甲状腺功能正常、甲状腺无明显肿大、没有压迫症状的HT患者只是要求随诊,不作任何治疗;当患者出现甲状腺功能减低时只能给与终身甲状腺激素替代治疗,很少有人从免疫调节的角度进行治疗。丙基硫氧嘧啶(propylthiouracil,PTU)是最常用的抗甲状腺药物。长期以来,人们在临床应用过程中逐渐发现PTU具有免疫调节作用,并且动物实验也得到证实。本课题即是从抗甲状腺药物的免疫调节作用入手,用PTUEAT进行治疗,期望为临床桥本甲状腺炎的治疗提供一条新思路。

    对象与方法

    一、研究对象

    雌性健康昆明小鼠,8-10周龄,体重20g左右,由山西医科大学动物实验中心提供。所有动物用标准饲料喂养,饮用自来水。

    二、动物分组

    72只昆明小鼠适应性喂养一周(条件:置于标准明暗条件下,照明周期12小时,室温21-26)后随机分为以下三组,每组24只。正常对照组 、EAT模型对照组及PTU治疗组。其中每一组依据用药时间不同再分为两个亚组,每个亚组12只。。正常对照组分为正常对照组4周组及正常对照6周组; EAT模型对照组分为EAT模型4周组及EAT模型6周组; PTU治疗组分为PTU治疗4周组及PTU治疗6周组。

    三、 建立EAT模型

    EAT模型对照组及PTU治疗组参照陈伟红等[1、2]的方法复制EAT模型。

    1)初次免疫:将甲状腺球蛋白(Tg)溶于PBS缓冲液中,制成浓度为2mg/ml的溶液,与完全弗氏佐剂(Freund Adjuvant Complete,CFA)等体积混合,充分乳化成油包水制剂,于第0天对小鼠进行皮下多点(颈部、背部、腹股沟等)注射(0.1ml)。

    2)加强免疫:第14天用上述PBS溶解的Tg溶液与不完全弗氏佐剂(Freund Adjuvant Incomplete,IFA)等体积混合制成乳化剂,对小鼠进行四肢内侧皮下注射(0.1ml)。

    四、 给药及处理方法

    1)正常对照组给予蒸馏水灌胃,每日0.3ml 。其中正常对照组4周组于4周后处死,正常对照6周组于6周后处死。

    2EAT模型对照组于初次免疫第10天开始蒸馏水灌胃,每日0.3ml。其中EAT模型4周组4周后处死,EAT模型6周组6周后处死。

    3PTU治疗组于初次免疫后第10天开始灌胃给药(丙基硫氧嘧啶20mg/d+甲状腺素4μg/d),PTU治疗4周组给药4周后处死,PTU治疗6周组给药6周后处死。(丙基硫氧嘧啶购自德国DR.Herbrand公司,甲状腺素购自深圳市中联制药有限公司)

    4)各组小鼠处死后经摘眼球取血,血液经离心获得血清,-20冷冻保存。用放射免疫法测定TGAb、TPOAb的值。并分离甲状腺,用10%中性福尔马林固定12-24小时,常规脱水石蜡包埋,4μm切片行HE染色,进行病理分析。

    五、统计学处理

    TgAb、TPOAb以均数±标准差表示,组间比较进行方差分析,病理分级采用秩和检验,发病率采用卡方检验或Fisher确切概率法,检验水准α0.05。所有实验数据用SPSS10.0统计学软件进行分析。

     


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